Mise au point des conditions d’expression et de purification de sialidases (H/F)

Structure d'accueil :

Nom de la structure et adresse : Laboratoire US2B – UMR 6286 – UFR sciences – Université de Nantes – 2 rue de la Houssinière, 44322 Nantes
Nom du responsable du laboratoire : Bernard Offmann
Responsable du stage :
Nom : DALIGAULT Franck
Tél. : 02.51.12.57.30
E-mail : franck.daligault@univ-nantes.fr

Description du stage proposé :
Dans le cadre d’un projet financé par l’Agence Nationale de la Recherche (ANR), nous cherchons à produire et purifier des enzymes de type sialidase. Ces enzymes serviront ensuite à évaluer l’efficacité d’inhibiteurs développés dans le cadre du projet.
L’objectif du stage est donc de déterminer les conditions optimales de l’expression de ces enzymes dans la bactérie E. coli. L’étape suivante consiste à purifier ces protéines et mettre au point la méthode de suivi de la réaction enzymatique. En fonction de la disponibilité des inhibiteurs (synthétisés par l’un des partenaires du projet), des essais d’inhibition pourraient également être menés.

Mots clefs : Enzymes, plasmide pET, purification IMAC, spectrophotométrie.

Prérequis et compétences attendus du candidat : Biologie moléculaire, microbiologie (transformation et culture de bactéries), expression et purification de protéines, enzymologie, spectrophotométrie (mesure d’absorbance et de fluorescence).